极个别同学
挑选单克隆实验步骤
A[细胞准备] --> B[有限稀释法]
B --> C[消化细胞→单细胞悬液]
C --> D[细胞计数→稀释至低浓度]
D --> E[接种96孔板（0.5-1细胞/孔）]
E --> F[培养箱培养（37℃, 5% CO₂）]
F --> G[筛选阳性单克隆]
G --> H[显微镜挑取单克隆孔]
H --> I[PCR/Western blot检测目的基因表达]
I --> J[阳性克隆扩大培养]
J --> K[24孔板→6孔板→培养瓶]
K --> L[全面鉴定（形态/表达/功能）]
L --> M{合格?}
M -->|是| N[细胞冻存（液氮/-80℃）]
M -->|否| O[重新筛选]
A[细胞准备] --> B[有限稀释法]
B --> C[消化细胞→单细胞悬液]
C --> D[细胞计数→稀释至低浓度]
D --> E[接种96孔板（0.5-1细胞/孔）]
E --> F[培养箱培养（37℃, 5% CO₂）]
F --> G[筛选阳性单克隆]
G --> H[显微镜挑取单克隆孔]
H --> I[PCR/Western blot检测目的基因表达]
I --> J[阳性克隆扩大培养]
J --> K[24孔板→6孔板→培养瓶]
K --> L[全面鉴定（形态/表达/功能）]
L --> M{合格?}
M -->|是| N[细胞冻存（液氮/-80℃）]
M -->|否| O[重新筛选]
2025-05-15
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